Genotoxicidade e citotoxicidade dos raios x em crianças submetidas à radiografia panorâmica / Genotoxicity and cytotoxicity of x-rays in children exposed to panoramic radiography

RESUMO Objetivo: Analisar a genotoxicidade e a citotoxicidade produzidas por raios X no epitélio da mucosa oral de crianças durante a obtenção da radiografia panorâmica. Métodos: A amostra foi constituída por 30 crianças saudáveis, sendo 19 do sexo feminino e 11 do masculino, com faixa etária de 4 a 10 anos (média de 7 anos de idade). As células epiteliais da mucosa oral foram coletadas por meio de citologia esfoliativa em base líquida imediatamente antes e após sete dias da obtenção da radiografia panorâmica. Os esfregaços foram processados e corados utilizando a técnica de Feulgen Rossenbeck modificada. Foram analisadas e quantificadas projeções nucleares dos tipos bud e broken egg, alterações genotóxicas na forma de micronúcleo e alterações citotóxicas dos tipos picnose, cariólise e cariorrexe. Resultados: A frequência de picnose, bud e broken egg foi significativamente maior após a exposição aos raios X (p<0,05), porém não houve diferença estatisticamente significante em relação ao sexo, bem como nas demais alterações estudadas. Conclusões: A exposição aos raios X emitidos durante a obtenção da radiografia panorâmica pode induzir à morte celular no epitélio da mucosa oral de crianças. Não foi encontrado indício significativo de efeito genotóxico.

ABSTRACT Objective: To assess the genotoxicity and cytotoxicity produced by X-rays in the epithelium of the oral mucosa of infants exposed to panoramic radiography. Methods: The sample consisted of 30 healthy children, 19 females and 11 males, ranging in age from 4 to 10 years (average of 7 years of age). Oral mucosa cells were collected by liquid-based cytology immediately before and after seven days following the exposure to panoramic radiography. Smears were processed and stained using the modified Feulgen Rossenbeck technique. Bud and broken egg nuclear projections, changes in the form of micronuclei, and genotoxic and cytotoxic changes of pyknosis, karyorrhexis and karyolysis were analyzed and quantified. Results: The frequency of pyknosis, buds and broken eggs was significantly higher after exposure to X-rays (p<0.05), but there was no statistically significant difference regarding gender, as well as in the other changes studied. Conclusions: Exposure to X-rays emitted during submission to panoramic radiography may induce cell death in the epithelium of children's oral mucosa. No evidence was found for a significant genotoxic effect.

Erythrocyte oxidative stress markers in children with sickle cell disease / Marcadores de estresse oxidativo em eritrócitos de crianças com doença falciforme

Abstract Objective To determine eight parameters of oxidative stress markers in erythrocytes from children with sickle cell disease and compare with the same parameters in erythrocytes from healthy children, since oxidative stress plays an important role in the pathophysiology of sickle cell disease and because this disease is a serious public health problem in many countries. Methods Blood samples were obtained from 45 children with sickle cell disease (21 males and 24 females with a mean age of 9 years; range: 3–13 years) and 280 blood samples were obtained from children without hemoglobinopathies (137 males and 143 females with a mean age of 10 years; range: 8–11 years), as a control group. All blood samples were analyzed for methemoglobin, reduced glutathione, thiobarbituric acid reactive substances, percentage of hemolysis, reactive oxygen species, and activity of the enzymes glucose 6-phosphate dehydrogenase, superoxide dismutase, and catalase. Data were analyzed using Student's t-test and were expressed as the mean ± standard deviation. A p-value of <0.05 was considered significant. Results Significant differences were observed between children with sickle cell disease and the control group for the parameters methemoglobin, thiobarbituric acid reactive substances, hemolysis, glucose 6-phosphate dehydrogenase activity, and reactive oxygen species, with higher levels in the patients than in the controls. Conclusions Oxidative stress parameters in children's erythrocytes were determined using simple laboratory methods with small volumes of blood; these biomarkers can be useful to evaluate disease progression and outcomes in patients.

Resumo Objetivo Determinar parâmetros de estresse oxidativo em eritrócitos de crianças com doença falciforme e compará-los com os mesmos parâmetros em eritrócitos de crianças saudáveis, pois o estresse oxidativo desempenha um importante papel na fisiopatologia da doença falciforme, considerada um sério problema de saúde pública em muitos países. Métodos Foram obtidas amostras de sangue de 45 crianças com doença falciforme (21 meninos e 24 meninas com média de 9 anos, variação de 3 a 13) e 280 amostras de sangue de crianças sem hemoglobinopatias (137 meninos e 143 meninas com média de 10 anos, variação de 8 a 11), como grupo controle. Em todas as amostras foram determinados meta-hemoglobina, glutationa reduzida, substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico, porcentagem de hemólise, espécies reativas de oxigênio e atividade das enzimas glucose6-fosfato desidrogenase, superóxido dismutase e catalase. Os dados foram analisados com o teste t de Student e foram expressos como média ± desvio padrão. Um valor de p < 0,05 foi considerado significativo. Resultados Foram observadas diferenças significativas entre as crianças com doença falciforme e o grupo controle para os parâmetros meta-hemoglobina, substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico, porcentagem de hemólise, espécies reativas de oxigênio e atividade da enzima glucose6-fosfato desidrogenase, com níveis aumentados nos pacientes. Conclusões Foi possível determinar parâmetros de estresse oxidativo em eritrócitos de crianças, com técnicas laboratoriais simples e pequenos volumes de sangue. Esses biomarcadores podem ser úteis na avaliação da progressão e dos resultados de tratamentos da doença.

Reduction of white mold level on soybean by fungicide management strategies / Redução do nível de mofo-branco na soja pelo manejo de fungicidas

The objective of this study was to verify the efficiency of the control of white mold on soybean with the use of fungicides applied alone and in rotation, at different growth stages and in a mixture of two active ingredients at three locations: Arapoti, PR, Mauá-da-Serra, PR and Pinhão, PR, Brazil. The fungicides used were carbendazim (Ca), thiophanate methyl (Tm), procymidone (Pr) and fluazinam (Fl). The experiments consisted on 17 treatments and 4 replications in a randomized block design. The analyzed variables were severity, incidence, number of sclerotia and yield. Mauá-da-Serra and Pinhão presented the highest incidences (31% and 29.8% in the control, respectively). At these two locations most of treatments with fungicides decreased the incidence and production of sclerotia, when compared to control; however, no differences in terms of yield were observed. Arapoti presented the lowest incidence (15.8% in the control) where most of treatments with fungicides did not present differences for the variables incidence, production of sclerotia and yield, when compared to the control. No differences were also observed for severity in any of three locations. In conclusion, fungicides applied in soybean areas with historically white mold incidence up to 31% can reduce the disease incidence and sclerotia production levels.

O objetivo deste estudo foi o de verificar a eficiência de controle do mofo-branco na soja com o uso de diferentes fungicidas aplicados isoladamente, alternados, em diferentes estádios fenológicos e em mistura de dois princípios ativos, em três locais: Arapoti/PR, Mauá-da-Serra/PR e Pinhão/PR, Brasil. Os fungicidas utilizados foram carbendazim (Ca), tiofanato metílico (Tm), fluazinam (Fl) e procimidona (Pr). Os experimentos foram compostos por 17 tratamentos e 4 repetições distribuídas em blocos aleatorizados. As variáveis analisadas foram incidência, severidade, produção de escleródios e o rendimento da cultura. Mauá-da-Serra e Pinhão apresentaram as maiores incidências, 31% e 29,8% no tratamento controle, respectivamente, onde a maioria dos tratamentos com fungicidas proporcionou menor incidência e produção de escleródios, quando comparados ao controle, porém sem diferenças quanto ao rendimento. Em Arapoti foi observada a menor incidência, 15,8% no controle, onde a maioria dos tratamentos com fungicidas não apresentou diferenças para incidência, produção de escleródios e rendimento, quando comparados ao controle. Em nenhum dos três locais foram verificadas diferenças entre os tratamentos e o controle para a variável severidade. Como conclusão, fungicidas aplicados em áreas de soja com histórico de incidência de mofo-branco de até 31% podem reduzir a incidência da doença e o nível de produção de escleródios.

Alternative products to control Sclerotinia sclerotiorum in soybean / Produtos alternativos no controle de Sclerotinia sclerotiorum na cultura da soja

The aim of this study was to evaluate different alternative products, foliar sprayed either alone or in combination with fungicide fluazinam, to control white mold in soybean at three locations: Arapoti, Mauá-da-Serra, and Pinhão, in Paraná state, southern Brazil. The following chemical products were used: sodium dichloroisocyanurate, benzalkonium chloride, pyroligneous extract, sodium hypochlorite, cobalt + molybdenum, sucrose, sodium bicarbonate and acibenzolar-S-methyl. Incidence, severity, yield, and number of sclerotia produced were analyzed. The majority of the variables did not follow the normal distribution of the data according to the Kolmogorov-Smirnov test; therefore, the use of non-parametric analysis was necessary. The analysis of all the treatments individually revealed no significant effects so it was decided to separate the analysis into the following groups of treatments: 'control', treatments using alternative products ('alternatives'), treatment only with fungicide ('fungicide') and treatments with alternative products and fungicide ('alternatives + fungicide'). In Arapoti, no significant differences for any variables were observed. In Mauá-da-Serra, the 'fungicide' and 'alternatives + fungicide' had the lowest incidence and number of sclerotia, with higher yield when compared to 'control' and 'alternatives'. No differences were observed for severity. In Pinhão, the 'fungicide' and 'alternatives + fungicide' were superior for incidence, number of sclerotia produced, and yield when compared to the 'control' and 'alternatives'. The 'alternatives + fungicide' showed significantly lower severity when compared to the control, 'alternatives' and 'fungicide' in Pinhão experiment. In conclusion, the alternative products applied in combination with fluazinam resulted in lower severity of white mold in soybean in the experiment conducted in Pinhão, and the application of fluazinam alone or in combination with alternative products, was efficient to control white mold in soybean in locations with high disease incidence.

O objetivo deste estudo foi avaliar diferentes produtos alternativos pulverizados via foliar, isoladamente ou em combinação com o fungicida fluazinam para o controle do mofo branco na cultura da soja, em três locais: Arapoti, PR, Mauá-da-Serra, PR e Pinhão, PR, Brasil. Os produtos utilizadas foram: dicloroisocianurato de sódio, cloreto de benzalcônio, extrato pirolenhoso, hipoclorito de sódio, cobalto + molibdenio, sacarose, bicarbonato de sódio e acibenzolar-S-metil. As variáveis analisadas foram incidência, severidade, rendimento e o número de escleródios produzidos. A maioria das variáveis não segue a distribuição normal dos dados conforme o teste Kolmogorov-Smirnov, assim sendo, o uso de testes não-paramétricos se fez necessário. A análise de todos os tratamentos individualmente não revelou efeitos significativos, onde optou-se por separar a análise em grupos de tratamentos, onde a testemunha foi denominada "controle"; os tratamentos com os produtos alternativos como "alternativos", o tratamento com o fungicida isolado como "fungicida" e os tratamentos com produtos alternativos e fungicida foi denominado "alternativos + fungicidas". Em Arapoti, não foram observadas diferenças estatisticamente significantes em nenhuma das variáveis analisadas. Em Mauá-da-Serra, os grupos 'fungicida' e 'alternativos + fungicida', apresentaram a menor incidência e número de escleródios, com maior rendimento quando comparados aos grupos 'controle' e 'alternativos'. Não foram observadas diferenças na severidade. Em Pinhão, os grupos 'fungicida' e 'alternativos + fungicida' foram estatisticamente superiores para incidência, número de escleródios produzidos e rendimento, quando comparados aos grupos 'controle' e 'alternativos'. O grupo 'alternativo + fungicida' apresentou severidade significativamente menor quando comparado aos grupos 'controle', 'alternativos' e 'fungicida' no experimento conduzido em Pinhão. Como conclusões, observou-se que os produtos alternativos aplicados em associação com o fungicida fluazinam proporcionaram menor severidade do mofo branco na cultura da soja no experimento conduzido em Pinhão, PR, e a aplicação do fungicida fluazinam isolado ou em associação com os produtos alternativos foi eficiente no controle do mofo branco na cultura da soja nos locais com alta incidência da doença.

Protective effect of flavonoids against reactive oxygen species production in sickle cell anemia patients treated with hydroxyurea

OBJECTIVE: The aim of this study was to evaluate the protective effects of quercetin, rutin, hesperidin and myricetin against reactive oxygen species production with the oxidizing action of tert-butylhydroperoxide in erythrocytes from normal subjects and sickle cell anemia carriers treated with hydroxyurea. METHODS: Detection of intracellular reactive oxygen species was carried out using a liposoluble probe, 2',7'-dichlorfluorescein-diacetate (DCFH-DA). A 10% erythrocyte suspension was incubated with flavonoids (quercetin, rutin, hesperidin or myricetin; 30, 50, and 100 µmol/L), and then incubated withtert-butylhydroperoxide (75 µmol/L). Untreated samples were used as controls. RESULTS: Red blood cell exposure to tert-butylhydroperoxide resulted in significant increases in the generation of intracellular reactive oxygen species compared to basal levels. Reactive oxygen species production was significantly inhibited when red blood cells were pre-incubated with flavonoids, both in normal individuals and in patients with sickle cell anemia. Quercetin and rutin had the highest antioxidant activity, followed by myricetin and hesperidin. CONCLUSION: Flavonoids, in particular quercetin and rutin, showed better antioxidant effects against damage caused by excess reactive oxygen species characteristic of sickle cell anemia. Results obtained with patients under treatment with hydroxyurea suggest an additional protective effect when associated with the use of flavonoids.

O uso do pool de plasma caseiro interfere no valor da RNI? / Does the use of in-house pooled plasma interfere in the INR value?

INTRODUÇÃO: O tempo de protrombina (TP) é o teste de escolha para monitorar o nível de anticoagulação em pacientes que fazem uso de anticoagulantes orais. Nestes, atualmente, a anticoagulação é monitorada pelo valor da relação normatizada internacional (RNI). OBJETIVO: A finalidade deste trabalho foi determinar se um pool de plasma caseiro, com cinco (P5) e 20 (P20) amostras, pode ser usado como controle normal do TP e se o uso deste pool interfere no resultado da RNI. MATERIAL E MÉTODOS: Foram 32 dias de experimentos. Os dois pools de plasma caseiro foram analisados em relação a um controle normal de plasma comercial (PC). Para cada dia de experimento, fez-se o TP de P5, P20 e PC e também se determinou o valor de RNI para P5, P20 e PC em pacientes que fazem uso de anticoagulante oral. As ferramentas estatísticas utilizadas foram média (X), análise de variância e teste de Tukey. RESULTADOS: A análise estatística demonstrou que os valores do TP e da RNI não são significativamente diferentes para PC, P5 e P20. CONCLUSÃO: O pool de plasma caseiro pode ser utilizado como controle normal do TP e o seu uso não interfere no valor da RNI.

INTRODUCTION: The prothrombin time (PT) test is commonly used to monitor anticoagulant levels in patients undergoing oral anticoagulant therapy. Currently, anticoagulation levels have been assessed through the international normalized ratio (INR) value. OBJECTIVE: The objective of this study was to determine if in-house preparations of polled plasma, containing five (P5) and 20 (P20) samples, respectively, may be used as normal control of PT and to assess its interference in INR values. MATERIAL AND METHODS: The experiment was performed in 32 days. Both polled plasma preparations were analyzed in comparison with a commercial control (PC). PT was performed for PC, P5 and P20 daily and the INR value for PC, P5 and P20 was assessed in patients undergoing oral anticoagulant therapy. The applied statistical tools were mean value (X), analysis of variance and Tukey test. RESULTS: There were no statiscally significant differences in PT and INR for PC, P5 and P20. CONCLUSION: In-house polled plasma (P5 and P20) may be applied as normal control of PT and it does not interfere in the INR value.

Toxoplasma gondii in goats from Curitiba, Paraná, Brazil: risks factors and epidemiology / Toxoplasma gondii em caprinos de Curitiba, Paraná, Brasil: fatores de risco e epidemiologia

Toxoplasmosis is a zoonosis caused by Toxoplasma gondii, a protozoan with wide geographical distribution and minimal parasitic specificity that affects many species of wild and domestic animals. In livestock, especially in small ruminants like goats, toxoplasmosis can cause abortion and the birth of weak animals, leading to economic losses to farmers, and is a major source of human infection. This is a seroepidemiological study of toxoplasmosis in goats in the state of Paraná, Brazil. Sera from 405 goats from the metropolitan mesoregion of Curitiba, eastern state, were tested by the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and indirect immunofluorescence antibody test (IFAT). Information on properties and goat characteristics was also collected using questionnaires. The prevalence of toxoplasmosis was 39.41 and 35.96% by ELISA and IFAT, respectively. T. gondii antibody prevalence increased with age. The risk factors for T. gondii infection in goats were: age over one year; exposure to cats, type of management and purpose of breeding. Other epidemiological factors and relevant control measures are discussed in the current study.

A toxoplasmose é uma zoonose causada pelo Toxoplasma gondii, um protozoário com vasta distribuição geográfica e pouca especificidade parasitária, que pode afetar muitas espécies de animais selvagens e domésticos. Em animais de produção, especialmente pequenos ruminantes, como caprinos, pode provocar abortos e nascimento de crias fracas, causando perdas econômicas para os criadores, além de ser uma importante fonte de infecção humana. Este é um estudo soroepidemiológico para toxoplasmose caprina no Estado do Paraná. Soros de 405 caprinos da mesorregião metropolitana de Curitiba, no leste paranaense foram avaliados pelas técnicas de imunoensaio enzimático (ELISA) e reação de imunofluorescência indireta (RIFI), além da avaliação de questionários com dados das propriedades e animais estudados. A prevalência encontrada foi de 39,41 e 35,96% para as técnicas ELISA e RIFI, respectivamente. A prevalência de anticorpos anti-T. gondii aumenta com a idade dos animais. Os fatores de risco para infecção por T. gondii em caprinos encontrados neste estudo são: idade acima de um ano, presença de gatos, tipo de manejo e propósito da criação. Outros fatores epidemiológicos e medidas de controle são discutidos no presente trabalho.

Reference values for methemoglobin concentrations in children

OBJECTIVE: The aim of this work was to establish reference values for methemoglobin levels in 6 to 10-year-old children. METHODS: Methemoglobin concentrations were studied in clinically healthy children. The method for methemoglobin measurement used, neither uses highly toxic chemical compounds nor expensive enzymatic methods, thus it is feasible in the laboratory routine. RESULTS: The results showed higher reference values for clinically healthy children (from 3.61 to 6.44 percent) than for adults (from 1.9 to 3.8 percent). CONCLUSIONS: The higher concentrations of methemoglobin in children may be explained by smaller amounts of soluble cofactor cytochrome b5 and reduced activity of the cytochrome b5 reductase enzyme in red blood cells which make children particularly susceptible to the development of methemoglobinemia. Methemoglobin concentrations in children are higher than in normal adult subjects thus, adult reference values cannot be used to interpret infant methemoglobinemia.

Ginkgo biloba extract (EGb 761) attenuates oxidative stress induction in erythrocytes of sickle cell disease patients

Sickle cell disease promotes hemolytic anemia and occlusion of small blood vessels due to the presence of high concentrations of hemoglobin S, resulting in increased production of reactive oxygen species and decreased antioxidant defense capacity. The aim of this study was to evaluate the protective action of a standardized extract of Ginkgo biloba (EGb 761), selected due to its high content of flavonoids and terpenoids, in erythrocytes of patients with sickle cell anemia (HbSS, SS erythrocytes) subjected to oxidative stress using tert-butylhydroperoxide or 2,2-azobis-(amidinepropane)-dihydrochloride, in vitro. Hemolysis indexes, reduced glutathione, methemoglobin concentrations, lipid peroxidation, and intracellular reactive oxygen species were determined. SS erythrocytes displayed increased rates of oxidation of hemoglobin and membrane lipid peroxidation compared to normal erythrocytes (HbAA, AA erythrocytes), and the concentration of EGb 761 necessary to achieve the same antioxidant effect in SS erythrocytes was at least two times higher than in normal ones, inhibiting the formation of intracellular reactive oxygen species (IC50 of 13.6 µg/mL), partially preventing lipid peroxidation (IC50 of 242.5 µg/mL) and preventing hemolysis (IC50 of 10.5 µg/mL). Thus, EGb 761 has a beneficial effect on the oxidative status of SS erythrocytes. Moreover, EGb 761 failed to prevent oxidation of hemoglobin and reduced glutathione at the concentrations examined.

A doença falciforme promove anemia hemolítica e oclusão dos pequenos vasos, causados pela presença de altas concentrações de hemoglobina S, cujas consequências incluem a produção aumentada de espécies reativas de oxigênio e diminuição da capacidade de defesa antioxidante. O objetivo desse estudo foi avaliar a ação protetora de um extrato padronizado de Ginkgo biloba (EGb 761), selecionado devido ao seu alto conteúdo de flavonóides e terpenóides, em eritrócitos de pacientes com anemia falciforme (HbSS, eritrócitos SS) submetidos ao estresse oxidativo usando terc-butil-hidroperóxido e 2,2-azobis-(amidinopropano)-diidrocloreto, in vitro. Índices de hemólise, glutationa reduzida, concentração de metemoglobina, peroxidação lipídica e espécies reativas de oxigênio foram determinados. Eritrócitos de pacientes com anemia falciforme apresentaram taxas aumentadas de oxidação da hemoglobina e peroxidação lipídica e a concentração de EGb 761 necessária para atingir o mesmo efeito antioxidante foi pelo menos duas vezes maior em relação aos eritrócitos normais (HbAA, eritrócitos AA), inibindo a formação de espécies reativas de oxigênio (IC50 de 13.6 µg/mL), prevenindo parcialmente a peroxidação lipídica (IC50 de 242.5 µg/mL) e prevenindo a hemólise (IC50 de 10.5 µg/mL). Portanto, EGb 761 possui um efeito benéfico no estado oxidativo dos eritrócitos SS. Entretanto, o EGb 761 não preveniu a oxidação da hemoglobina e da glutationa reduzida, nas concentrações examinadas.

Characterization of virulence genes cagA and vacA in Helicobacter Pylori and their prevalence in gastrointestinal disorders

Prevalence of H. pylori infection was determined using cultures of gastric biopsy samples of patients attended at the academic hospital of the Federal University of Paraná, Curitiba, Paraná, Brazil. Molecular methods were used to characterize the cagA and vacA genes from bacterial isolates associated with different diseases presented by patients. Out of a total of 81, forty-two gastric biopsy samples tested were positive for H. pylori, with a prevalence of 51.9 percent. No significant difference was found with regard to the gender (p=0.793) and age (p=0.183) of the patients. Genotype s1m1 vacA gene was found in 67 percent of the cases of peptic ulcer investigated (p=1.0), despite the limited number of patients with this disease (n=3). A correlation between the presence of less virulent strains (s2m2) and reflux esophagitis was found in the majority of the cases (45 percent), but without statistical significance. An association between the prevalence of cagA gene, found in 92 percent of isolates, and peptic ulcer was not observed (p=1.0), suggesting that this gene cannot be considered a specific marker of severity in our environment. The results reinforce the importance of conducting regional studies and the need to characterize H. pylori virulence genes associated with different diseases.

Avaliação do pool de plasma caseiro como controle normal para o tempo de tromboplastina parcial ativada (TTP) / Evaluation if in-house preparations of polled plasma can be used as a normal control of partial thromboplastin time (PTT)

INTRODUÇÃO: A utilização correta de um plasma-controle para a comparação com o plasma do paciente nos testes de coagulação é fundamental para a garantia de um resultado seguro dessas provas laboratoriais. OBJETIVO: O presente estudo analisou a viabilidade do uso de um pool de plasma caseiro, realizado com cinco (P5) e 20 (P20) amostras a partir de pacientes normais, para ser utilizado como controle normal do tempo de tromboplastina parcial (TTP). MATERIAL E MÉTODO: Os dois pools de plasma caseiro foram analisados em relação a um controle normal comercial (AP). Foram 10 dias de experimento e a cada dia os dois pools caseiro eram feitos. Para cada dia foi feito o TTP de P5, P20 e AP. Todos os pacientes com solicitação de TTP, em cada dia do experimento, tiveram a relação de tempos (R) determinada frente a P5, P20 e AP. As ferramentas estatísticas utilizadas foram média (X), análise de variância e teste de Tukey. RESULTADOS: A análise estatística demonstrou que os valores de TTP são significativamente diferentes entre AP e P5 e entre AP e P20, mas não há diferença significativa entre P5 e P20. Quando a relação de tempos foi analisada, não houve diferença significativa entre AP, P5 e P20. CONCLUSÃO: O estudo demonstrou que pode ser utilizado como controle normal um pool de plasma caseiro, feito a partir de cinco ou 20 amostras.

INTRODUCTION: Proper utilization of plasma control for comparison with the plasma of patients with coagulation tests is critical to ensure a safe outcome of these laboratory tests. OBJECTIVE: The purpose of this work was to know if in-house preparations of polled plasma can be used as a normal control of partial thromboplastin time (PTT). MATERIAL AND METHOD: We make two polled plasma, one with five (P5) samples and another with 20 (P20) samples, both of them from normal patients. Both pooled plasma were analyzed in comparison with a commercial lyophilized control (AP). The experiment was performed in 10 days, and P5 and P20 were made daily. At each day PTT was performed for P5, P20 and AP. All patients who asked for TTP, in each day of this experience, got a time relation (R) determined by a P5, P20 e AP. Tukey test was used as statistical analysis. RESULTS: Statistically significant differences were detected among the PTT for AP and P5, AP and P20, but no difference between P5 and P20 was observed. When the time relations were tested, there were no significant difference, among AP, P5, and P20. CONCLUSION: We found that in-house preparations of polled plasma (P5 and P20) can be used as a normal control of PTT.

Termografia infravermelha em tempo real como método de avaliação da viabilidade do baço em modelo de esplenectomia parcial em porcos / Real-time infrared thermography as an evaluation method of spleen viability in partial splenectomy in pigs

OBJETIVO: Determinar se a termografia infravermelha é capaz de detectar com precisão a perda de perfusão tecidual em áreas de parênquima esplênico. MÉTODOS: Cinco porcos Landrace pesando entre 12 a 15 kg, após medicação pré-anestésica intramuscular e anestesia por infusão endovenosa, foram submetidos a quatro etapas de ligaduras sequenciais, dos vasos arteriais para o pólo inferior do baço: 1-vasos do ligamento esplênico; 2-ramo da artéria esplênica para o pólo inferior; 3-ramo arterial para o pólo inferior na face visceral do órgão; 4-parênquima esplênico dividindo o órgão. As imagens foram captadas por câmera Therma CAM SC500 instalada a 50 centímetros da superfície do órgão. As temperaturas foram medidas na região proximal (vascularizada) e na região distal (isquêmica), em três áreas circulares distintas de cada região através do software SAT Report, antes e após cada etapa de ligaduras, constituindo cinco grupos de medidas: tempo 0 = antes da etapa 1; tempo 1 = após etapa 1; tempo 2 = após etapa 2; tempo 3 = após etapa 3; tempo 4 = após etapa 4. RESULTADOS: Houve manutenção da temperatura da região proximal (vascularização preservada) durante todos os tempos de desvascularização. A temperatura da região distal (desvascularizada) iniciou queda a partir da primeira ligadura e tornou-se estatisticamente menor que a da região proximal a partir da ligadura 3 (Etapa 3). Houve diferença estatisticamente significativa entre as temperaturas proximais e distais do órgão na medida em que foram sendo realizadas as ligaduras vasculares. CONCLUSÃO: A termografia infravermelha foi capaz de distinguir com precisão áreas de parênquima esplênico com vascularização preservada de áreas isquêmicas e pode contribuir para a avaliação da viabilidade de órgãos sólidos.

OBJECTIVE: To determine if infrared thermography is capable of precisely detecting loss of tissue perfusion in the spleen during a partial splenectomy. METHODS: Five Landrace pigs, weighing between 12 and 15 kg, after intramuscular pre-anesthetic medication and intravascular infusion anesthesia, were submitted to four sequential vascular interruption steps of the arterial vessels to the lower splenic pole: 1-vessels of splenic ligament; 2-splenic artery branch to the lower pole; 3-arterial branch to the lower pole on the organ visceral surface; 4-splenic parenchyma, splitting the organ. The images were captured by a Therma CAM SC500 camera 50 centimeters from the organ surface. The parenchymal temperatures were measured from the proximal (irrigated) areas and from the distal (ischemic) areas in three distinct circle regions of each area using SAT Report software, before and after each vessels interruption step, establishing five groups of measurement times: time 0 = before interruption step 1; time 1 = after interruption step 1; time 2 = after interruption step 2; time 3 = after interruption step 3; time 4 = after interruption step 4. RESULTS: Proximal area temperatures (preserved vessels) remained stable during all the vessel interruption steps. The temperature of the distal area (compromised vessels), as compared to the proximal area, dropped continually throughout the sequential interruption steps and became statistically lower after interruption step 3 (time 3). There was a statistical difference between the proximal and distal temperatures of the organ as the vascular structures were being interrupted in each step. CONCLUSION: Infrared thermography is capable of precisely distinguishing irrigated splenic parenchyma from the ischemic areas and can contribute to the evaluation of solid organ viability.

Citologia em meio líquido para exame de citologia cérvico-vaginal. Estudo comparativo sobre a atividade fixadora de etanol e de formaldeído / The use of formaldehyde and ethanol as fixative agents in the liquibased cytology tecnique for performing cervical cytology exames(paptest)

A citologia em meio liquído tem sido considerada importante alternativa para o ganho de sensibilidade do exame de papanicolaou. Este trabalho teve o objetivo de estudar variações no método de citologia em meio líquido. Foram coletadas...

Colorimetric determination of alpha and beta-cyclodextrins and studies on optimization of CGTase production from B. firmus using factorial designs

A produção de ciclodextrina glicosiltransferase (EC2.4.1.19, CGTase) de B. firmus isolada de solo de Curitiba, PR, foi otimizada com o uso de modelo estatístico fatorial. Foi estudado o efeito de componentes no meio básico bem como pH inicial e temperatura na produção da enzima. O modelo de fatorial 2k-1 foi usado. A atividade da CGTase foi monitorada pelo método colorimétrico com alaranjado de metila. Houve produção da CGTase quando a fonte de carbono era amido e beta -CD, mas quando galactose, lactose, sacarose e maltose foram usadas, nγo houve nenhuma produção de enzima. A produção de CGTase foi a mesma com a fonte de nitrogênio orgânico ou inorgânico. A atividade da CGTase diminuiu 2 vezes quando a temperatura de incubação foi aumentada de 28 a 37 ° C, e diminuiu 2,1 vezes quando o pH inicial foi abaixado de 10,3 a 7,4. As determinações colorimetricas de alfa e beta - CD foram analisadas como regressão não linear e a constante de equilíbrio para os complexos alfa -CD/alaranjado de metila e beta -CD/fenolftaleina foram 7,69 x 103 L/mol e 2,33 x 103L/mol, respectivamente

Studies on alkalophilic CGTase-producing bacteria and effect of starch on cyclodextrin-glycosyltransferase activity

A produção de b - e g -CD pela CGTase de Bacillus firmus foi estudada com respeito ao efeito de diferentes fontes e concentrações de amido. A CGTase utilizada neste estudo foi obtida da cepa 31 isolada em estudos anteriores. Foram observadas atividades cíclicas de acúmulo da produção e consumo de b -CD e g -CD pela bactéria. A atividade enzimática ensaiada em solução tampão citrato (pH 5,5) foi maior que em solução tampão Tris-HCl (pH 8,5). Não foi observada diferença na produção de g - CD em diferentes fontes comerciais de amido (milho, mandioca e batata), comparados com amido Sigma (p>0,05). Foram encontradas diferenças para a produção de b -CD em todas as fontes de amido utilizadas. O uso de féculas de amido comerciais diminuiu a produção de b -CD comparados com amido Sigma. As concentrações de b -CD e g -CD apresentaram uma variação ao longo do tempo, em função da concentração de amido no meio de cultivo (2, 5, 10 e 15%). Nem as diferentes fontes de amido nem as suas diferentes concentrações alteraram a atividade específica da CGTase. A atividade dextrinizante da enzima em presença de ácido glutâmico, complexante de CD, não apresentou diferença significativa em relação ao controle.

Método de papanicolaou em material cérvico-vaginal para a triagem de infecção por Candida sp., Trichomonas vaginalis e Chlamydia trachomatis / Papanicolaou method in cervical smears to diagnosis of Candida sp., Trichomonas vaginallis and Chlamydia trachomatis infections

O método de Papanicolaou, utilizado na triagem para a detecção do câncer cervical, pode ser relevante para o diagnóstico das doenças sexualmente transmissíveis (DST). O objetivo deste estudo é verificar se o mesmo é útil para a detecção de alguns agentes etiológicos de DST. Examinou-se a secreção vaginal e o raspado cérvico vaginal de 223 mulheres atendidas na Unidade de saúde Jardim Santos Andrade, Curitiba - PR, pelo método do Papanicolaou e por cultura para Candida sp, por exame a fresco para T. vaginallis e por imunofluorescência direta para C. trachomatis. Para a detecção de Candida sp, o método de Papanicolaou apresentou sensibilidade e especificidade de 23,3% e 96,8%, respectivamente, em relação à cultura, mas apresentou concordância de 86,3% com o método de Gram. A sensibilidade e especificidade do método Papanicolaou para o diagnóstico de T. vaginallis foram, respectivamente, 60 e 99,5% em relação ao exame a fresco. A presença de inclusões eosinofílicas, usualmente em células metaplásicas, em 3,7% dos esfregaços cervicais, foi critério sugestivo de infecção por C. tracomatis, com sensibilidade e especificidade de 37,5% e 100%, respectivamente, em relação à imunofluorescência direta. O método de Papanicolau foi específico na detecção de infecção pelos agentes estudados, porém limitado quanto à sensibilidade. A análise de resultados obtidos sugere que o exame de Papanicolaou pode contribuir na detecção de casos de DST.

Programa de controle da qualidade externo em hematologia: variações interlaboratoriais para eritrograma e plaquetas em Curitiba e Região Metropolitana, PR / External quality control program in hematology: interlaboratory variability for red blood cell and platelets values in Curitiba and Metropolitan Area, PR, Brazil

A padronização e o controle de qualidade representam elementos imprescindíveis para a rotina laboratorial. Este projeto teve como objetivo analisar a variabilidade interlaboratorial, a partir da distribuição de amostras preservadas para os valores de eritrograma e contagem de plaquetas. Foram preparadas amostras estáveis para eritrograma e contagem de plaquetas a partir de unidades de sangue venoso de 3 doadores, coletadas no Banco de Sangue do Hospital de Clínicas da UFPR. Os eritrócitos e as plaquetas foram isolados e ressuspensos em meio CE após fixação parcial com glutaraldeído (leonart et al. Rev. Brasil. Anal. Clin. 21: 111, 1989; Emendorfer et al Rev. Bras. Anal. Clin. 32: 191, 2000), para amostras controle altas, médias e baixas. Distribuiu-se alíquotas a 14 Laboratórios de Análises Clínicas de Curitiba e Região Metropolitana, que determinaram que os valores do eritrograma e plaquetas, semanalmente, empregando os equipamentos T890 e STKS (Coulter), Cell Dyn 1400,1700 e 3500 (Abbott) ou Sysmex (Roche). Verificou-se o desempenho dos laboratórios por meio dos gráficos de controle de qualidade, determinando-se a frequência de resultados de fora dos limites controle. Observou-se menor ocorrência desses limites para os laboratórios que realizavam controle de qualidade externo e interno, e uma correlação aceitável entre os resultados obtidos com os equipamentos empregados. Tais resultados incentivam a utilização de sistemas de qualidade para assegurar a padronização das técnicas e garantir o controle de qualidade nos Laboratórios e Análises Clínicas.

Isolation of alkalophilic CGTase-producing bacteria and characterization of cyclodextrin-glycosyltransferase

One hundred and twenty five soil samples were collected from the regions of roots of corn, cassava, potato, bean, sugar cane, soya, and pumpkin. From these, 75 strains were isolated that produced a yellowish halo surrounding the colonies, due to a phenolphtalein-cyclodextrin (CD) complex, and these were selected as alkalophilic CGTase-producing bacteria. All the 75 strains were identified as Bacillus firmus by microscopy and biochemical tests. The activity of the CGTase's varied from 2² to 2(10) dilutions,when assayed by CD-trichloroethylene (TCE)-complex precipitation. Strain 31 that produced the enzyme at the higher level was selected, and its enzyme was partially purified by starch adsorption (x 17) in a yield of 51 percent. Maximum enzyme activity occurred at pH 5.5 and 8.5. At pH 5.5, the optimum temperature was 60°C. On increased from 30°C to 85°C, the thermodynamic parameter for activation energy was 8.27 kcal.mol-1. The enzyme was inhibited by Ca2+, Mg2+, Fe2+, Cu2+, Mn2+, and Zn2+